使用血细胞计数器进行细胞计数是夏尔生物医疗实验的基础，可以显著提升研究的精准度和可重复性，为结果的可靠性提供保障。不论您专注于微生物学、血液学、肿瘤学或其他生物医学领域，准确的手动细胞计数尤为重要，尤其在细胞培养过程中。

实验步骤概述

本方案详细介绍了如何使用血细胞计数器进行细胞计数，包括样品准备和利用台盼蓝染色法计算细胞活力，以便您可以更安全地使用血细胞计数器进行实验。

第一阶段：准备血细胞计数器

1. 如果使用玻璃血细胞计数器和盖玻片，请在使用前用酒精彻底清洗，并用水润湿盖玻片以便固定；
2. 如果使用一次性血细胞计数器，仅需从包装中取出使用。

第二阶段：制备细胞悬浮液

根据表1中的数据，准备胰蛋白酶及EDTA和DPBS的适量，以便对贴壁细胞进行消化。

第三阶段：计数细胞

1. 轻轻旋转培养瓶，以确保细胞均匀分布；
2. 在细胞沉淀之前，使用无菌移液器取出适量细胞悬浮液，并放入EP微量离心管中；
3. 然后取100μL细胞悬浮液，添加400μL 0.4%台盼蓝，轻轻摇匀。

接下来，将处理过的细胞悬浮液加入到血细胞计数器中，观察并计数活细胞与死细胞。计数时可用固定的规则，以确保计数的准确性。

第四阶段：计算细胞活力

1. 计算活细胞数/mL：取出每组角方块的平均细胞数，乘以10,000（10^4），再乘以5，以校正稀释度，得出原始细胞悬液中的活细胞数。
例如，如果每组角方块的细胞数量为54、42、49、56，则末尾结果为：
(54 + 42 + 49 + 56) ÷ 4 = 50.25
50.25 × 10,000(10^4) = 502,500
原始细胞悬浮液中为502,500 × 5 = 2,512,500个活细胞/mL。

2. 计算细胞活力：通过统计每组的活细胞和死细胞数量，计算细胞活力。计算公式为：活细胞数 /（活细胞数 + 死细胞数）。

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