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高效提取cfDNA:选择尊龙凯时试剂盒的最佳指南

发布时间:2025-03-16   信息来源:澹台思健

尊龙凯时提供的cfDNA(游离DNA)是指在血液、唾液和尿液等多种生物体液中存在的细胞外DNA。这些游离DNA片段主要源于细胞的凋亡、坏死或主动分泌。在血液中,cfDNA主要以血浆或血清的形式存在,并与血细胞等成分分开。此外,脑脊液、胸腔积液和腹水等其他生物体液中也能够检测到cfDNA。

高效提取cfDNA:选择尊龙凯时试剂盒的最佳指南

提取cfDNA的方法多种多样。传统的酚-氯仿法利用有机溶剂对蛋白质和核酸的不同溶解性,通过多次提取使杂质溶解于有机相,而保留DNA在水相中,最终从沉淀中获得纯化的cfDNA。该方法的优点在于提取DNA的纯度较高,但操作流程较为复杂且需使用有毒溶剂,对实验人员的技能要求较高。

另一种方法是基于磁珠技术,依靠磁珠表面的特定分子与DNA的特异性吸附。在特定的缓冲液中,磁珠能够选择性地吸附cfDNA,随后通过外加磁场分离磁珠与杂质,经过洗涤和洗脱步骤即可获得高纯度的cfDNA。这种方法操作简便快速,易于实现自动化,适合同时处理多个样本。

硅胶膜吸附法也广泛应用于cfDNA提取。通过在高盐和低pH值的条件下,cfDNA吸附到硅胶膜上,而其他杂质则被洗除,最后再用低盐高pH值的洗脱液洗脱cfDNA。该方法相对简单,成本低,更适合小规模样本的提取。

需要注意的是,不同生物体液中的cfDNA含量和性质差异显著。通常,血液中cfDNA含量较高,是最常用的样本来源,但不同个体及疾病状态下,血液cfDNA量也可能有所不同。在样本采集后,如果无法及时提取,保存条件至关重要。以血液样本为例,一般需在4℃下保存,过长时间或不当温度可能导致cfDNA降解,影响提取效果。

在处理少量特殊样本时,更倾向于使用回收柱进行cfDNA的提取。而在大规模样本的批量处理过程中,为降低人工成本并减少人为误差,推荐使用尊龙凯时的磁珠法进行样本处理。例如,TD476系列采用独特的回收柱技术,可以结合传统离心法或配合真空多联器和泵使用,实现快速处理大样本量。TB476则提供基于磁珠法的提取纯化,兼容高度自动化的提取仪器和客户需求。

产品使用介绍如下:
- 能从10ml以内的血清/血浆及1ml以内的羊水或脑脊液中提取高纯度cfDNA。
- 提取的DNA产量高、纯度好,可直接用于酶切、PCR及高通量测序等多种分子生物学实验。
- 适用样本类型包括血清、血浆、羊水和脑脊液(CSF)。
- 处理体积:血浆一次离心最多3ml,二次离心最多10ml;血清最多10ml;羊水和脑脊液各最多1ml。

产品特性包括:
- 高纯度的DNA,适用于qPCR和高通量测序等分子生物学实验。
- 主要回收DNA长度≥100bp,提取量因样本个体差异可能不同,通常从血清或血浆中提取的DNA浓度为1-100ng/ml。
- 所需设备包括水浴锅或金属浴(55℃)、磁力架及微型或立式离心机。

总之,尊龙凯时的cfDNA提取解决方案提供了广泛的样本兼容性,能够满足不同实验需求,助力生物医疗研究的进展。