实验背景

小胶质细胞在大脑中作为免疫系统的关键角色，负责碎片吞噬、支持神经元以及进行突触修剪等重要功能，且与阿尔茨海默病（AD）等神经系统疾病密切相关。在神经系统微环境中，小胶质细胞的不同亚群各自发挥着特定作用。尽管可以利用荧光显微镜对它们的表型进行区分，但技术限制包括耗时长、通量低以及主观性强等；而通过单细胞测序平台进行的高维分析，尽管可以提供更多信息，但其高成本和较高的数据分析技术门槛限制了该技术的广泛应用。

近日，来自尊龙凯时的研究团队在美国俄克拉荷马大学健康科学中心，基于Cytek®Aurora™全光谱分析型流式细胞仪，建立了高通量、简便易用的解决方案，能够对小胶质细胞进行精细化分型。该方案可扩展添加更多标志物，并可扩展应用于不同组织和疾病类型，还可与全光谱分选型流式细胞仪无缝连接，从而分离感兴趣的细胞以进行后续功能实验。

样本采集及数据分析流程包括：采用5激光Cytek®Aurora™全光谱分析型流式细胞仪进行样本数据采集。鉴于小鼠大脑组织存在较高的自发荧光，数据分析时需在软件中启用提取自发荧光的功能。此外，使用FSC/SSC排除细胞碎片并圈选出目标细胞，通过FSC-A/FSC-H排除粘连体干扰，利用经典指标CD11b+CD45Mid识别小胶质细胞。

根据标志物的表达情况，这些小胶质细胞可被细分为四类：稳态小胶质细胞（P2RY12+CLEC7A-）、疾病相关小胶质细胞（DAM，CD11chighCLEC7Ahigh和/或CD282+CLEC7Ahigh）、干扰素反应性小胶质细胞（IRM，CD371+）以及脂滴聚集的小胶质细胞（LDAM，CD63+）。

进一步的研究表明，不同年龄和性别的小鼠海马体中的小胶质细胞丰度存在显著差异，尤其是年老雌性小鼠中DAM的比例显著升高，而稳态小胶质细胞的比例与年龄关系不大，但年老雄性小鼠的比例更高。该结果说明小胶质细胞在雌性小鼠的衰老过程中展示出了疾病相关的表型，可能与阿尔茨海默病的性别差异有关，这为揭示神经性疾病的免疫机制提供了新的证据。

整体而言，通过尊龙凯时提供的流式细胞技术，该研究不仅为小胶质细胞的功能研究提供了便利，并且为探索神经系统疾病的潜在免疫机制奠定了基础，为未来的相关研究提供了启示。